液相色譜壓力和基線問題解析
液相色譜中壓力問題和基線問題及其解決方法如下:
1. 壓力問題:
* 壓力低:
* 低粘度流動相:使用Kozeny-Carmen或類似方程計算預期壓力。
* 活塞密封墊泄漏:檢查是否存在漏液現象,必要時更換相關部件。
* 系統泄漏:檢查是否有漏液,擰緊或更換相關漏液部件。
* 系統中有氣泡:確保溶劑瓶或溶劑管線經過灌洗,且purging閥關閉,脫氣機正常工作。
* 溶劑過濾吸頭、單向閥及管線等壓力傳感器之前的部件堵塞:用分段排除法檢查系統管路是否堵塞。
* 泵流速故障:用計量過的器皿判斷泵流量是否準確,確認故障報修。
* 壓力高:
* 高粘度流動相:使用Kozeny-Carmen或類似方程計算預期壓力。
* 泵流速故障:用計量過的器皿判斷泵流量是否準確,確認故障報修。
* 壓力傳感器之后的管路堵塞、檢測器流通池、自動進樣器進樣針或針座堵塞:用分段排除法確定堵塞的位置,沖洗(反沖)或更換相關部件。
* 保護柱或分析柱堵塞:沖洗(反沖)或更換相保護柱或分析柱。
* 壓力波動:
* 單向閥堵塞造成:超聲清洗單向閥。
* 管路中有氣泡:重新purge管路。
2. 基線問題:
* 基線波動、基線漂移:
* 系統未平衡:至少10倍柱體積平衡系統。注意室溫是否穩定避免空調出風口直吹儀器。
* 流通池中有氣泡:沖洗流通池。
* 保護柱被污染:更換保護柱。
* 檢測器污染:按照廠商要求清洗流通池。
* 溶劑被污染:更換溶劑。
* 檢測器燈能量低:更換相關燈。
* 梯度洗脫:使用純度更高的溶劑或選擇其他波長,如還存此情況屬正?,F象。
* 系統泄漏:檢查泄漏位置,擰緊或更換泄漏處部件。
* 溫度波動:使用柱溫箱,如條件要求苛刻可使用柱前加熱模塊及柱后冷卻模塊??刂剖覝兀苊饪照{出風口直吹儀器。
* 色譜柱污染:更換保護柱必要時更換分析柱。
* 泵未適當混合溶劑:在梯度洗脫時如儀器為低壓系統確保比例閥正常工作,如儀器時高壓系統確保泵流速精準混合器正常工作。
* 溶劑過濾器堵塞:超聲(浸泡)清洗溶劑過濾器,應注意材質是否可以超聲。
* 峰形問題(以展寬為例):
* 系統未平衡:用至少10倍柱體積平衡系統。
* 進樣溶劑過強:確保進樣溶劑強度與流動相強度相當或更弱。
* 進樣體積過高:減少進樣體積。
* 柱外體積過高:減小樣品濃度。
* 溫度波動:使用柱溫箱。
* 保護柱污染或失效:更換新的保護柱。
* 基線噪音大:
* 流動相中有氣體——溶劑脫氣;
* 流動池中有氣泡——在出口處使用0.009”的管路;
* 色譜柱上的污染物被洗脫——平衡系統,直至基線穩定;如樣品中有保留非常強的組分,可設置強洗脫程序;
* 滲漏——此時應修復滲漏,重新連接或更換接頭;
* 檢測器燈能量低——更換燈;
* 靈敏度太高——使用合適的采樣頻率,調節增益(如ELSD檢測器);
* 檢測器流動池臟——清潔流動池;
* 電噪音——除去電噪音的來源:屏蔽電纜,清潔觸點;
* 采樣頻率設置過大——一味追求高采樣頻率,可能對靈敏度沒有任何幫助,同時也會產生比較大的噪音:UV檢測器推薦降低采樣頻率,HPLC推薦1-5Hz,UPLC推薦20Hz。
* 同步的基線噪音:大多數情況下都是泵引起的,泵頭中存在空氣——將溶劑脫氣,并重新灌注泵; 單向閥問題——超聲清洗單向閥或更換; 柱塞桿斷裂——更換; 混合問題——更換一個體積更大的Mixer,以增加系統體積; 電噪音——改變電路,除去